血细胞分析仪CRP一体机临床应用性能评价

迈瑞体外诊断2019-07-06 22:59:02

郭平1   王剑飚1   陈骊婷 1   石厚荣 1    肖建萍 2

(1.上海交通大学医学院附属瑞金医院 检验科  2. 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司)

本文转载自《检验医学与临床》2016年5月第13卷第9期1216~1219,数据图表部分请参看原文


【摘要】 

目的:评价血细胞分析仪CRP一体机的临床应用。

方法:对Mindray BC-5390 血细胞分析仪CRP一体机检测时的空白计数、携带污染率、重复性、CRP线性、各参数与比对仪器结果的相关性、不同模式下CRP结果的相关性、CRP结果的稳定性及干扰因素等进行测试。

结果:BC-5390 本底、空白计数及携带污染率均符合要求;重复性测试中血常规主要计数参数及CRP的CV%值均小于2%;CRP具有良好的线性,在0.2~320mg/L范围内,相关系数R2>0.990;血常规主要计数参数与 Sysmex XN-9000 相关系数在0.98以上,各分类参数除了Bas%外,相关系数均大于0.95;CRP结果与 Immage 800 相关系数R2达到了0.9953;BC-5390 各模式间CRP检测结果相关系数R2也在0.99以上;低温条件下CRP结果在48小时内保持相对稳定,室温条件下24小时内比较稳定,相对偏差<5%;异常样本干扰验证,除发现两例极高值RBC样本(>8.0*1012/ L)与对比仪器CRP结果偏差略大,其它各种异常样本未见干扰。

结论:BC-5390 具有良好的临床性能,能够满足临床使用需要,是一款理想的血常规及CRP一体机。


【正文】

CRP 与白细胞联合检测在临床上的应用十分广泛[1-3],但同时检测血常规及CRP的一体机目前较为少见。迈瑞公司新推出的BC-5390 血细胞分析仪CRP一体机是一台能够进行全血细胞计数、白细胞五分类和全血C-反应蛋白(CRP )测定为一体的血液分析仪。该仪器采用电阻抗法进行全血细胞计数,采用细胞化学染染色结合流式细胞方法进行白细胞五分类测定,采用免疫比浊法进行CRP检测,同时还会根据样本中血细胞压积结果对CRP结果进行修正。本文将对其能否满足临床应用进行了初步测试,结果报告如下。


一、材料与方法

1、仪器与试剂:迈瑞 BC-5390 全自动血细胞分析仪CRP一体机、相关配套试剂、相关质控品及校准品,由深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司生产。XN-9000 全自动血细胞分析仪、配套试剂、质控及校准品,由日本Sysmex公司生产。Immage 800 全自动免疫分析仪、配套试剂及标准品,由美国Beckman Coulter公司生产。

2、标本:EDTA-K2抗凝静脉血。与 XN-9000 Immage 800 进行比对的标本数量均不少于100例。Immage 800上检测的标本均预先3500rpm离心5分钟后吸取血浆层测试。

3、方法:评估 BC-5390 的本底及空白计数、携带污染率、重复性、CRP线性范围、BC-5390XN-9000 血常规结果相关性、BC-5390Immage 800 CRP结果相关性、CRP在不同模式(BC-5390具有血常规+CRP模式、全血CRP模式、血常规模式、预稀释血常规+CRP模式、预稀释CRP模式、预稀释血常规模式等多种检测模式,具有自动进样及封闭进样两种进样方式)下结果比对、CRP结果稳定性及干扰因素等项目。

4、统计学分析:实验数据采用 MicrosoftExcel 2007进行数据统计。

5、质量控制:BC-5390安装、调试完毕,按照仪器操作程序,用配套的校准品对仪器进行校准。每次实验前均执行血常规及CRP质控,确认结果在允许范围内。比对仪器每日检测前均执行配套质控,确认结果在允许范围内。


二、结果

1、本底及空白计数:1)每天记录仪器开机本底;2)将稀释液作为样本上机检测,取三次结果中的最大值作为空白计数结果。

结果显示:血常规主要计数参数及CRP检测结果均为 “0” 。

2、重复性:随机选取1例EDTA-K2抗凝静脉血标本,连续测试10次,采集后2小时内完成检测。计算均值(mean)、标准差(SD)和变异系数(CV%)。

结果显示:重复性测试中血常规主要参数WBC、RBC、HGB、PLT及CRP的CV%值均小于2%,Eos%和Bas%的CV%相对较大。

3、携带污染率:选择WBC、RBC、HGB、PLT及CRP各参数低值与高值进行交叉测定,高值样本连续测定3次,依次记录为H1、H2、H3,接着连续测定3次低值样本,依次记录为L1、L2、L3。计算携带污染率。

结果显示:WBC、RBC、HGB、PLT及CRP的携带污染率分别为:0.02%、0.28%、0.00%、0.16%、0.02%。各参数携带污染率均小于2%。

4、CRP线性:用接近线性范围上限的高浓度样品和接近线性范围下限的低浓度样品,稀释成多个不同浓度梯度样本。每个稀释度测试3次后取均值,作线性回归并计算相关系数R2 。考虑到CRP线性范围较宽,我们分为低值段(0.2~10mg/L)、中值段(10~100mg/L)、高值段(100~320mg/L)三个范围进行测试。

结果显示:低值段、中值段、高值段线性回归相关系数R2分别为0.9984、0.9996和0.9928。

 5、BC-5390XN-9000血常规结果的相关性:选取不少于100例EDTA-K2抗凝静脉血标本,分别在BC-5390XN-9000 上进行测试,对结果进行相关性分析

结果显示:BC-5390与XN-9000 的WBC、RBC、HGB、MCV、PLT、Neu%、Lym%、Mon%、Eos%及Bas%的相关系数R2分别为0.9987、0.9910、0.9973、0.9615、0.9869、0.9779、0.9690、0.9471、0.9258及0.4416。

6、BC-5390与Immage 800 CRP结果的相关性:选取334例EDTA-K2抗凝静脉血标本(0~287.04mg/L),分别在BC-5390及Immage 800上进行测试(Immage 800上检测的标本均预先3500rpm离心5分钟后吸取血浆层测试),将Immage 800 的CRP结果单位换算为mg/L后作相关性分析。

结果显示:两台仪器CRP检测结果的相关系数R2达到了0.9953,CRP平均绝对偏差为0.71mg/L,平均相对偏差为5.28%。

7、仪器不同模式下CRP结果的相关性:

7.1 全血CD+CRP模式与全血CRP模式下CRP结果的相关性:选取135例样本分别在血常规+CRP模式及全血CRP模式下进行测试。

结果:两种模式CRP检测结果相关系数R2=0.9996。

7.2 全血CD+CRP模式与预稀释CD+CRP模式下CRP结果的相关性:选取40例样本分别在全血模式与预稀释模式下进行测试。

结果:全血模式与预稀释模式CRP相关系数R2=0.9941。

8、稳定性:随机选取10例标本,每份标本平均分成两份,一份低温

(2℃~8℃)冰箱保存,另一份室温(22℃~25℃)保存。冰箱内的样本在检测前平衡至室温,检测后冰箱冷藏。依次在采血后1h、24h、48h、72h在BC-5390 上测定CRP,每份标本测定两次,10个标本取均值,以第1小时的结果为基准,其他时间点的结果与之比较。

结果显示:低温保存条件下CRP结果在48小时内比较稳定,室温保存条件下24小时内比较稳定。

9、干扰试验:选取WBC>100×109/L、PLT>500 ×109/L、HGB<70g/L、RBC>6.0×1012/L、脂血及黄疸标本,每种类型不少于5例。使用  Immage 800及BC-5390 检测上述标本CRP,对比检测结果

结果显示:在标本存在WBC>100×109/L、PLT>500×109/L、HGB<70g/L、RBC6.0×1012/L、脂血及黄疸的情况下,BC-5390 CRP检测结果与Immage 800的绝对偏差较小,受上述因素的影响较小。


三、讨论

        C-反应蛋白(CRP)是一种环状五聚体蛋白,由于其通过磷酸胆碱残基与肺炎链球菌的C多糖结合,因此得名为CRP。其一级结构包括五个相同的亚单位,亚单位间以非共价键相结合,白介素6是CRP合成的主要刺激因子[4]

本次实验在血常规主要计数参数及CRP空白测试结果均为“0”的背景下进行,结果显示:BC-5390重复性测试中血常规主要参数WBC、RBC、HGB、PLT及CRP的CV%值均小于2%,Eos%和Bas%由于所占百分比较低,变异系数相对较大。WBC、RBC、HGB、PLT及CRP各参数携带污染率极低(<0.3%)。低温条件下CRP结果在48小时内保持相对稳定,室温条件下24小时内比较稳定,相对偏差<5%。CRP根据灵敏度及线性范围的不同分为超敏CRP及普通CRP,超敏CRP对心血管疾病的预测具有一定的价值[5-6],而普通CRP在判断是否存在感染或组织损伤等方面存在较高的临床价值[7]

本次实验用的BC-5390具有较宽的线性范围,基本覆盖了超敏CRP及普通CRP的检测范围,并且在低值段(0.2~10mg/L)、中值段(10~100mg/L)与高值段(100~320mg/L)均表现了良好的线性,相关系数R2分别为0.9984、0.9996和0.9928。BC-5390与XN-9000 血常规结果的比较显示了其良好的相关性,主要参数相关系数达到了0.98以上,白细胞分类除了Bas%,其余均达到0.95以上。Bas%相关性略差,原因可能为Bas%结果范围较窄及不同仪器对嗜碱性粒细胞检测的方法学差异所致;BC-5390与Immage 800 的CRP检测结果(0~287.04mg/L)高度相关,相关系数R2=0.9953。由于BC-5390 具有单独CRP检测模式、全血细胞计数及CRP检测模式以及预稀释全血细胞计数及CRP检测模式,对不同进样模式之间是否存在差异我们进行了测试,结果显示不论在全血CD+CRP模式与全血CRP模式下进行比较还是全血CD+CRP模式与预稀释CD+CRP模式下比较,模式间的相关系数 R2均>0.99。

        进行干扰试验时我们发现前期验证有两例极高值RBC样本(>8.0*1012/ L)CRP检测结果与比对仪器偏差较大,我们怀疑存在极个别情况下的红细胞增多症标本会影响仪器CRP检测结果,为此我们追加选择了10例RBC大于6.5×1012/L的标本,先在BC-5390CRP上进行全血CRP检测,再将标本3500rpm离心5分钟,吸取上层血浆分别在BC-5390 和Immage 800上检测CRP,10例标本的BC-5390CRP全血CRP结果、血浆CRP结果及Immage 800血浆CRP结果差异不明显,前期发现的高值RBC样本 BC-5390 CRP与Immage 800 偏差大的现象并没有重现,我们后续将继续收集相关病例进行验证。其余存在WBC > 100 × 109/L、PLT>500×109/L 、HGB<70g/L、脂血及黄疸的情况时,BC-5390与Immage 800 对CRP检测结果的绝对偏差都比较小,两台仪器间的结果具有可比性,未受上述因素的干扰。

       有文献报道[8]新生儿感染是儿科常见病症,疾病早期临床症状并不明显且缺乏特异性,不利于及早治疗。 CRP作为急性时相反应蛋白,一旦机体受到感染,则能在4~6 h 内迅速升高,并于36~50 h 内达到高峰,机体感染后的CRP 含量可达正常含量的100~1000 倍,且不受年龄、血型、体温、贫血、妊娠等因素的影响,因此CRP 可用于新生儿感染检测中[9]。传统方法检测血清CRP标本用量大,婴幼儿采血十分困难,而POCT设备操作繁琐,人为影响因素较多,可能影响结果准确度及精密度,对临床造成误诊及漏诊。BC-5390 作为一台全自动血细胞分析仪CRP一体机,仅需80微升全血,采用开放模式,无需对标本(静脉/末梢血)进行预处理,即可在2分钟内获得血常规及CRP结果,如果样本连续检测,平均检测时间仅1分钟左右,解决婴幼儿同时测定血常规及CRP的问题,适合在门、急诊使用。


【参考文献】

[1].孙俊. 全自动血细胞分析仪对CRP 与白细胞联合检测的临床应用评价[J].医疗器械,2011,8(11):277-280.

[2].王文静,郭丙申.C-反应蛋白与白细胞联合检测的临床应用[J].医学理论与实践,2009,22(6):701-702.

[3].张莉.C-反应蛋白和血常规测定的临床意义[J].当代医学,2012,18(36):93-94.

[4]. 王燕刘中娟林嘉友, C反应蛋白的临床应用进展[J].2008,29(6):530-531.

[5]. 王玉敏王权杨广民,急性冠脉综合征患者肌钙蛋白Ⅰ、超敏CRP、脑钠肽水平变化及临床意义[J].中国实验诊断学,2013,17(10):1871-1872.

[6]. 王前郑磊曾方银,超敏C-反应蛋白的研究现状及临床应用[J]. 中华检验医学杂志.2004,27(8):542-544.

[7].储怡星、张锦锋、范基农,等C-反应蛋白水平对判断炎症和创伤转归的价值[J].上海医学检验杂志.2000,15:155-156

[8]. 薛可,CRP检测与新生儿感染的关联性[J]. 中国卫生标准管理,2015,6:29-29.

[9]. 陈潮青,罗学虹,陈宜升.PCT 与hs-CRP 在新生儿感染早期诊断的临床研究[J].中国临床医生,2013,41(8):26-27.



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